超声波快速石蜡制片法
临床活检,用常规石蜡制片法制作,病理报告如没特殊情况,一般都需要三天才能发出。其程序基本是活检当天下午取材,晚上组织脱水及浸蜡,第二天上午包埋切片及染色,当切片送达医生手里时,已是第二天的上午,下午看阅切片,至复检医生手里时,已是第三天的时间了。这是一般的工作时间,可这对于急需获得病理结果的患者来说,三天时间确实太长,尤其是门诊病人,远道求医的患者,或者外地甚至国外的患者,三天的时间就意味着等待,住宿及消费。为了解决上述的问题,减少患者的经济负担,为患者蠃来保贵的治疗时间,超声波快速石蜡制片法可胜任此项工作。
超声波的工作原理:
超声波的高频振谐下以每秒80万次作缩张运动,在此掁谐下,也促进了被超声波所作用的试剂中分子的运动。由于分子运动加快,加速了组织与各种试剂的反应,使整个操作程序在短时间内完成。
超声波快速石蜡制片法程序:
几种不同组织处理时间表(mins)
步骤与试剂 |
肠粘膜 |
鼻咽部粘膜宫内膜等 |
胶原纤维较多组织 |
1.10%缓冲褔尔马林 |
4 |
5 |
10 |
2.丙酮 |
3 |
5-7 |
10 |
3.丙酮 |
3 |
5-7 |
10 |
4.二甲苯 |
3 |
5-7 |
10 |
5.石蜡 |
5 |
7-10 |
12 |
3)注意事项:
1.本法中所用的脱水剂为丙酮,它比酒精具有更强的脱水作用。虽然从理论上讲,它对组织具有很强的收缩作用,但为了能在短时间内使组织能够彻底脱水,不得不首选它。从已做的近千例次的实验中认为,它与常规切片相比较,没有什么区别。
2.有人提出,既然要快,何不用冰冻切片来制作,对于这个问题,肯定的回答是不能。因为冰冻切片与石蜡切片不一样,虽然目前机器及技术都是一流,制出切片近似于石蜡切片,但还是达不到石蜡切片的好,切片不能作长期保存,这就会影响档案的保管和资料的积累。
3.为了减少组织的收缩,脱水剂第一缸用酒精代替,但为了使组织获得彻底脱水,时间要相对延长些。
4.丙酮沸点较低,70℃左右就会沸腾,如此挥发较快,因此组织脱水时,注入丙酮的量要够,否则很容易使其干涸。
5.操作时要仔细观察,组织如果没到编程的时间,就已浮于脱水剂的上面,说明组织已经彻底脱水,可提前进入下一步。
6.切片后的染色,可用超声波来染色。
快速石蜡制片法
这是一种传统的制作法,在有的单位或者没有配备超声波快速石蜡处理仪的情况下而又急需诊断的一种制作法,较适合于小组织的制作。
(1)胃、肠粘膜组织快速制作法
1.10%缓冲福马林5 mins。
2.80%酒精5mins。
3.90%酒精5mins。
4.95%酒精5mins。
5.100%酒精5mins
6.二甲苯 5mins
7.石 蜡 15mins
注意事项:
1.全部步骤都在65℃的恒温箱中进行。
2.浸蜡也可在酒精灯上进行,但要小心,浸蜡温度过高,也可导致组织变脆。
3.包埋时,可用预先制作的蜡模(这样可节省石蜡硬化的时间)用镊子在酒精灯上烧红,然后点于蜡膜上,将组织放进去,然后放入冰箱的冰枚中冻起来,即可切片。
4.如遇取材多个部位多块组织时,就不能用上述的方法,否则多块组织包在一起时,不能处于同一水平面上,不利于切全组织。
(2)鼻咽部粘膜、宫内膜及穿刺物快速制作法。
1.10%缓冲福马林固定 5-10mins。
2.80%酒精 5-10mins。
3.90%酒精 5-10mins。
4.95%酒精 5-10mins。
5.100%酒精 5-10mins。
6.二甲苯 5mins。
7.浸蜡 20mins
注意事项:
上述步骤都于65℃恒温箱中进行。
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