郭芃利2李孜垚2卢帆3何彦芳1△张晓1△
(1.成都医学院实验技术教研室 2. 成都医学院2007级临床本科班, 3. 成都医学院2008级临床本科班, 成都,四川,610081)
目的
尽管在体外细胞培养实验中已经证实纤维细胞生长因子(FGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、血管内皮生长因子(EGF)等因子具有神经营养作用,但是它们在神经管发育过程中的定位表达和变化规律仍然还不清楚,因此,本实验将探索神经营养因子在人胚神经管发育过程中的表达及意义。
方法
用23天、35天和45天的人胚进行免疫组织化学ABC法染色,以成纤维细胞生长因子(FGF)、胰岛素样生长因子(IGF)、血管内皮生长因子(EGF)作为观测指标,运用图像分析技术,观测镜下染色结果。分析它们在神经发育过程中的表达及意义。各组阳性细胞数和光密度值的比较用q检验进行统计分析。
结果
在早期人胚神经管发育中,室管膜层、中间层、边缘层均可见IGF、 FGF 、 EGF表达,各层细胞胞质及细胞之间可见棕黄色免疫反应阳性物。在人胚23天,神经管上皮细胞胞质中可见IGF免疫反应阳性物,随时间的推移,IGF阳性细胞大量增加,45天的平均光密度值(2393.78±791.04),高于23天和35天,(P<0.05),且分布广泛。血管内皮生长因子(EGF)在神经管处表达,45天的平均光密度值(1310.48±372.28),高于23天和35天,(P<0.05);成纤维细胞生长因子(FGF)与以上两因子在神经管同区域表达,人胚35天的平均光密度值(2085.85±498.72)显著高于23天,45天出现下降趋势,平均光密度值(1413.28±435.66)(P<0.05)。在23天、35天、45天胚胎神经管发育中,IGF的平均光密度值均高于EGF和FGF(P<0.05)。
结论在人胚早期发育的过程中,IGF和EGF随着神经管的发育而不断增加、 FGF在发育过程中在7周达到峰值。IGF的表达比EGF和FGF强,提示IGF在神经管的分化与成熟过程中起主导作用,EGF和FGF起协同作用,共同促进神经管的分化发育。
关键词神经营养因子;人胚胎;发育