丁培培2 刘姿辰2 李瑞3 陈建敏1 张晓1△
（1.成都医学院实验技术教研室 2. 成都医学院2007级本科班，3 成都医学院2008级临床本科班 成都，四川，610081）
目的：神经细胞的凋亡是脊髓发育过程中的重要事件，本实验将观察细胞凋亡因子Fas、FasL和Caspase-3在人胚早期脊髓发育中的表达的分布状况，研究这些因子的表达与脊髓神经细胞发育的关系，将有助于认识神经细胞生长和分化的微环境，为临床应用神经干细胞治疗脊髓损伤提供线索。
方法：收集早期人胚23天、35天和45天标本，用4%多聚甲醛固定后制作8μm厚的石蜡切片；间隔取片分组，分别用Fas、FasL和Caspase-3抗体对人胚标本的组织切片行免疫组织化学ABC法染色，DAB棕色反应呈色，图像分析，观察Fas、FasL、和Caspase-3在人胚早期神经管发育中的分布以及细胞定位。各组阳性细胞数和光密度值的比较用q检验进行统计分析。
结果：Fas免疫反应阳性物分布在室管膜层、中间层和边缘层，45天时Fas免疫阳性细胞呈强阳性反应，平均积分光密度值（2311.250±270.8926），高于23天和35天（P<0.05）。FasL的免疫反应阳性细胞分布在室管膜层的细胞膜和胞浆中，从23天到45天表达逐渐增强，45天的平均积分光密度值（2626.500±782.9086）达到峰值。Caspase-3免疫阳性细胞主要分布在神经管的室管膜层和中间层，23天的平均积分光密度值（6565.750±370.0174）最高，此后，在35天和45天出现下降趋势。另外，在胚胎23天，Caspase-3的平均积分光密度值比Fas和FasL的平均积分光密度值高，（P<0.05）。在胚胎45天，Fas和FasL的平均积分光密度值比Caspase-3高，（P<0.05）。
结论：在人胚发育早期，Caspase-3的高表达，提示神经细胞凋亡主要采用由线粒体介导的内源性途径，神经细胞在各种凋亡信号的刺激下，激活Caspase3级联反应引起神经细胞凋亡。在人胚发育晚期，Fas和FasL增高，提示神经细胞的凋亡受到外源性凋亡途径的协同作用，Fas是死亡受体家族成员之一，通过募集Caspase-8的前体形成凋亡诱导信号复合物，启动Caspase的级联反应，诱导细胞凋亡。因此，早期人胚神经管神经细胞的凋亡是内源性和外源性多种凋亡信号参与协同的结果。
关键词：胚胎，发育，凋亡